生博提供：载体构建服务，也可以针对构建好的外源质粒DNA进行稳定筛选。针对质粒DNA的抗性标志，选择相应的药物，并对所需筛选的细胞进行药物测试，选择细胞全部凋亡时药物的最低浓度。瞬时转染后，在该浓度条件下进行筛选。10-14天后，挑取单克隆，扩增后通过RT-PCR检测mRNA表达情况或客户提供靶基因特异性抗体，生博提供Western Blot检测，根据蛋白表达情况，进一步筛选出稳定细胞株。

服务流程图

实验流程图

[NextPage]

实验结果

      稳定细胞株构建成功后，通过RT-PCR或 Western Blot鉴定筛选结果。被筛选出的稳定细胞株可以持续性表达目的基因或蛋白。同时可以根据要求为客户提供RT-PCR结果或Western Blot结果。

部分带有绿色荧光的稳定株

报价与周期

参考文献

[1]  Grez M, Akgün E, Hilberg F, Ostertag W. Proc Natl Acad Sci. 1990 Dec;87(23): 9202- 9206.
[2]  Poeschla E, Corbeau P, Wong-Staal F. Proc Natl Acad Sci. 1996 Oct 5;93(21):11395- 11399.

相关产品

[1]  G418 Gibco Cat. No.11811
[2]  High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kits  Cat.No.4368813
[3]  SunBio Trans-EZ 常见细胞系转染试剂Cat.No.STP07006
[4]  Lipofectamine™ 2000 transfection reagent Invitrogen Cat. No.11668-019